Brug for hjælp til en kemi-opgave 1. semester


#1

Kære alle interesserede
Jeg håber, at nogen kan hjælpe mig at finde beregningsvejen til følgende opgave, som fornylig blev stillet til eksamen:

Opgave 2B
Enzymet dihydrofolatreduktase (DHFR) katalyserer reaktionen mellem NADPH og
dihydrofolsyre (H2FA) til tetrahydrofolsyre (H4FA) og NADP+:

Enzymet har følgende karakteristika: Km for NADPH = 0,16 μM, kcat = 11 s-1, molmasse =
22000 g/mol. Desuden er følgende ekstinktionskoefficienter ved l= 340 nm bestemt for
NADPH: e 340 = 6200 cm-1 M-1, og for H2FA: e 340 = 12300 cm-1 M-1, medens ingen af
produkterne absorberer ved denne bølgelængde.
I en række forsøg måltes initialhastigheden (ændringen af [NADPH] ([NADPH] ) per tid)
ved forskellige koncentrationer af H2FA og med fast koncentration af NADPH på 5 μM, og
resultaterne er givet i nedenstående skema.
[H2FA] (μM) 0,03 0,06 0,09 0,12 0,15 0,18
[NADPH] (nM s-1) -2,2 -3,6 -4,7 -5,5 -6,1 -6,6

  1. a) Udregn fra disse data Km (for H2FA) og vmax for enzymreaktionen.
    Regression til Michaelis-Menten : v = vmax · [S] / KM + [S]

Løsning:

vmax = 11,14 nM s-1 ; KM = 123,7 nM

nogen bud, hvordan dette beregnes?

Mvh

Wuff


#2

Nu er jeg bestemt ikke nogen ørn til det, men mit gæt er at lave et Hanes- eller Lineweaver-Burk plot?


#3

Uden at regne med særligt mange decimaler kommer jeg ret tæt på facit med et lineweawer-burk plot
følgende punkter plottes: Husk at regne nM/s om til uM/s
X-akse
1/[H2FA]
Um
33,33
16,6
11,1
8,33
6,66
5,55

Y-akse
1/ v
uM/s
454,54
277,77
212,76
181,81
163,93
151,51

I excel kan man finde formlen for linien til at være y = 10,933x + 91,756.
Dette tegner en ret linie og skæring med X og Y akse udregnes (Ved tegning i hånden aflæses skæringerne blot). Derfra udregnes tilbage således at:
skæring med X = -1/ km og skæring med y = 1/ Vmax
Udfra dette kan resultaterne udregnes…
Håber at det er nogenlunde rigtigt:-) og forståeligt